Če je zdravnik za vas ali vašega otroka priporočil test za kariotip ali po amniocentezi, kaj ta test vključuje? Katere pogoje lahko diagnosticira kariotip, kakšni so koraki pri izvajanju testov in kakšne so njegove omejitve?
PASIEKA / SPL / Getty ImagesKaj je test kariotipa?
Kariotip je fotografija kromosomov v celici. Kariotipe lahko vzamemo iz krvnih celic, plodovih kožnih celic (iz plodovnice ali posteljice) ali celic kostnega mozga.
Pogoji, diagnosticirani s testom kariotipa
Kariotipe lahko uporabimo za odkrivanje in potrditev kromosomskih nepravilnosti, kot sta Downov sindrom in sindrom mačjega očesa, obstaja pa lahko več različnih vrst nepravilnosti.
Kromosomske nepravilnosti:
- Trisomije, v katerih so tri kopije enega od kromosomov in ne dveh
- Monosomije, pri katerih je prisotna samo ena kopija (namesto dveh)
- Delecije kromosoma, pri katerih manjka del kromosoma
- Kromosomske translokacije, pri katerih je del enega kromosoma pritrjen na drug kromosom (in obratno pri uravnoteženih translokacijah.)
Primeri trisomije vključujejo:
- Downov sindrom (trisomija 21)
- Edwardov sindrom (trisomija 18)
- Patauov sindrom (trisomija 13)
- Klinefelterjev sindrom (XXY in druge različice) - Klinefelterjev sindrom se pojavi pri 1 od 500 novorojenih moških
- Triple X sindrom (XXX)
Primer monosomije vključuje:
- Turnerjev sindrom (X0) ali monosomija X - Približno 10% splavov v prvem trimesečju je posledica Turnerjevega sindroma, vendar je ta monosomija prisotna le pri približno enem od 2.500 živorojenih žensk
Primeri kromosomskih delecij vključujejo:
- Cri-du-Chatov sindrom (manjkajoči kromosom 5)
- Williamsov sindrom (manjkajoči kromosom 7)
Translokacije - Obstaja veliko primerov translokacij, vključno s translokacijskim Downovim sindromom. Robertsonijeve translokacije so precej pogoste in se pojavijo pri približno 1 od 1000 ljudi.
Mozaicizem je stanje, pri katerem imajo nekatere celice v telesu kromosomske nepravilnosti, druge pa ne. Na primer, mozaični Downov sindrom ali mozaična trisomija 9. Popolna trisomija 9 ni združljiva z življenjem, toda mozaična trisomija 9 lahko povzroči živorojenost.
Ko je končano
V številnih primerih lahko zdravnik priporoči kariotip. Ti lahko vključujejo:
- Dojenčki ali otroci, ki imajo zdravstvene težave, ki kažejo na kromosomsko nenormalnost, ki še ni bila diagnosticirana.
- Odrasli, ki imajo simptome, ki kažejo na kromosomsko nenormalnost (na primer moški s Klinefelterjevo boleznijo lahko ostanejo nediagnosticirani do pubertete ali odrasle dobe.) Nekatere mozaične motnje trisomije so lahko tudi nediagnosticirane.
- Neplodnost: Za neplodnost lahko naredimo genetski kariotip. Kot je bilo omenjeno zgoraj, lahko nekatere kromosomske nepravilnosti ostanejo nediagnosticirane do zrelosti. Ženska s Turnerjevim sindromom ali moški z eno od različic Klinefelterjeve bolezni se morda ne zaveda stanja, dokler se ne spopade z neplodnostjo.
- Prenatalno testiranje: V nekaterih primerih, kot je translokacijski Downov sindrom, je stanje lahko dedno in starši se lahko testirajo, če se je otrok rodil z Downovim sindromom. (Pomembno je omeniti, da največkrat Downov sindrom ni dedna motnja, temveč bolj naključna mutacija.)
- Mrtvorojenost: Kariotip se pogosto opravi kot del testiranja po mrtvorojenosti.
- Ponavljajoči se splavi: Starševski kariotip ponavljajočih se splavov lahko namigne na razloge za te uničujoče ponavljajoče se izgube. Menijo, da so kromosomske nepravilnosti, kot je trisomija 16, vzrok za vsaj 50% splavov.
- Levkemija: Testiranje kariotipa lahko opravimo tudi za pomoč pri diagnosticiranju levkemij, na primer z iskanjem kromosoma Philadelphia, ki ga najdemo pri nekaterih ljudeh s kronično mielogeno levkemijo ali akutno limfocitno levkemijo.
Vključeni koraki
Kariotipski test se morda sliši kot preprost krvni test, zaradi katerega se mnogi sprašujejo, zakaj traja toliko časa, da dobimo rezultate. Ta test je po zbiranju pravzaprav precej zapleten. Oglejmo si te korake, da boste lahko razumeli, kaj se dogaja v času čakanja na test.
1. Zbiranje vzorcev
Prvi korak pri izvajanju kariotipa je zbiranje vzorca. Pri novorojenčkih se odvzame vzorec krvi, ki vsebuje rdeče krvne celice, bele krvne celice, serum in druge tekočine. Kariotip bo narejen na belih krvnih celicah, ki se aktivno delijo (stanje, znano kot mitoza). Med nosečnostjo je lahko vzorec amnijska tekočina, odvzeta med amniocentezo, ali del posteljice, odvzet med testom za vzorčenje horionskih resic (CVS). Amnijska tekočina vsebuje plodove kožne celice, ki se uporabljajo za ustvarjanje kariotipa.
2. Prevoz v laboratorij
Kariotipi se izvajajo v določenem laboratoriju, imenovanem citogenetični laboratorij - laboratorij, ki preučuje kromosome. Vse bolnišnice nimajo laboratorijev za citogenetiko. Če vaša bolnišnica ali zdravstvena ustanova nima lastnega laboratorija za citogenetiko, bo testni vzorec poslan v laboratorij, specializiran za analizo kariotipa. Testni vzorec analizirajo posebej usposobljeni citogenetski tehnologi, dr. citogenetiki ali medicinski genetiki.
3. Ločevanje celic
Za analizo kromosomov mora vzorec vsebovati celice, ki se aktivno delijo. V krvi se bele krvne celice aktivno delijo. Tudi večina plodovih celic se aktivno deli. Ko vzorec doseže laboratorij za citogenetiko, se nedelujoče celice ločijo od delilnih celic s posebnimi kemikalijami.
4. Rastoče celice
Da bi imeli dovolj celic za analizo, se delijo celice gojijo v posebnih gojiščih ali celični kulturi. Ta medij vsebuje kemikalije in hormone, ki celicam omogočajo, da se delijo in razmnožujejo. Ta postopek gojenja lahko traja tri do štiri dni za krvne celice in do en teden za plodove celice.
5. Sinhronizacija celic
Kromosomi so dolga vrsta človeške DNK. Da bi kromosome videli pod mikroskopom, morajo biti kromosomi v najbolj kompaktni obliki v fazi celične delitve (mitoze), znani kot metafaza. Da bi pripeljali vse celice do te posebne faze celične delitve, celice obdelamo s kemikalijo, ki ustavi celično delitev na točki, kjer so kromosomi najbolj kompaktni.
6. Sproščanje kromosomov iz njihovih celic
Da bi te kompaktne kromosome videli pod mikroskopom, morajo biti kromosomi zunaj belih krvnih celic. To naredimo z obdelavo belih krvnih celic s posebno raztopino, ki povzroči, da počijo. To se naredi, ko so celice na mikroskopskem drsniku. Ostanki belih krvnih celic se izperejo, tako da se kromosomi zataknejo za drsnik.
7. Obarvanje kromosomov
Kromosomi so naravno brezbarvni. Da bi ločili en kromosom od drugega, na stekelce nanesemo posebno barvilo, imenovano barvilo Giemsa. Barvilo Giemsa obarva regije kromosomov, ki so bogate z bazami adenin (A) in timin (T). Ko so kromosomi videti kot strune s svetlimi in temnimi trakovi. Vsak kromosom ima poseben vzorec svetlih in temnih pasov, ki citogenetiku omogočajo ločevanje enega kromosoma od drugega. Vsak temen ali svetel pas obsega na stotine različnih genov.
8. Analiza
Ko so kromosomi obarvani, drsnik postavimo pod mikroskop za analizo. Nato se posname slika kromosomov. Do konca analize bo določeno skupno število kromosomov in kromosomi razporejeni po velikosti.
9. Štetje kromosomov
Prvi korak analize je štetje kromosomov. Večina ljudi ima 46 kromosomov. Ljudje z Downovim sindromom imajo 47 kromosomov. Mogoče je tudi, da imajo ljudje manjkajoče kromosome, več kot en dodaten kromosom ali del kromosoma, ki manjka ali je podvojen. Če pogledamo samo število kromosomov, je mogoče diagnosticirati različna stanja, vključno z Downovim sindromom.
10. Razvrščanje kromosomov
Po določitvi števila kromosomov bo citogenetik začel razvrščati kromosome. Za razvrščanje kromosomov bo citogenetičar primerjal dolžino kromosomov, postavitev centromer (območja, kjer sta združeni kromatidi) ter lokacijo in velikost pasov G. Parovi kromosomov so oštevilčeni od največjega (številka 1) do najmanjšega (številka 22). Obstaja 22 parov kromosomov, imenovanih avtosomi, ki se natančno ujemajo. Obstajajo tudi spolni kromosomi, samice imajo dva X kromosoma, moški pa X in Y.
11. Pogled na strukturo
Poleg skupnega števila kromosomov in spolnih kromosomov bo citogenetičar preučil tudi strukturo specifičnih kromosomov, da se prepriča, da ne manjka ali dodatnega materiala, pa tudi strukturne nepravilnosti, kot so translokacije. Translokacija se zgodi, ko je del enega kromosoma pritrjen na drug kromosom. V nekaterih primerih se zamenjata dva kosa kromosomov (uravnotežena translokacija), drugič pa samo en kromosom doda ali manjka dodaten košček.
12. Končni rezultat
Na koncu končni kariotip prikaže skupno število kromosomov, spol in morebitne strukturne nepravilnosti pri posameznih kromosomih. Ustvari se digitalna slika kromosomov z vsemi kromosomi, razporejenimi po številu.
Meje testiranja kariotipa
Pomembno je omeniti, da čeprav lahko testiranje kariotipa daje veliko informacij o kromosomih, vam ta test ne more povedati, ali so prisotne posebne genske mutacije, na primer tiste, ki povzročajo cistično fibrozo. Vaš genetski svetovalec vam lahko pomaga razumeti, kaj vam lahko sporočajo testi kariotipa in česa ne. Potrebne so nadaljnje študije za oceno možne vloge genskih mutacij pri boleznih ali splavih.
Pomembno je tudi omeniti, da včasih testiranje kariotipa morda ne bo moglo zaznati nekaterih kromosomskih nepravilnosti, na primer, če je prisoten mozaicizem posteljice.
Trenutno je testiranje kariotipa v prenatalnem okolju precej invazivno in zahteva amniocentezo ali vzorčenje horionskih resic. Vendar je vrednotenje DNK brez celic v vzorcu materine krvi zdaj pogosto kot veliko manj invazivna alternativa za prenatalno diagnozo genskih nepravilnosti pri plodu.
Beseda iz zelo dobrega
Med čakanjem na rezultate kariotipa se lahko počutite zelo zaskrbljeni in teden ali dva, potreben za doseganje rezultatov, se lahko počuti kot eoni. Vzemite si čas, da se naslonite na prijatelje in družino. V pomoč je lahko tudi spoznavanje nekaterih stanj, povezanih z nenormalnimi kromosomi. Čeprav so številna stanja z diagnozo kariotipa lahko uničujoča, pa veliko ljudi živi s temi stanji z odlično kakovostjo življenja.
-for-epilepsy-treatment.jpg)
.jpg)
.jpg)
.jpg)
